التقاطيع | Sectiones

ما هو التقاطيع

التقاطيع (جمع قطيعة) هي عبارة عن عملية قطع المقاطع من الأنسجة المدمجة في كتل البارافين إلى شريحة رقيقة ووضعها على شرائح المجهر لغرض فحصها بالمجهر. أما فيما يتعلق بفحص الأنسجة فتهدف الإجراءات النسيجية إلى توفير تقاطيع ذات نوعية جيدة يمكن استخدامها لإجراء تقييم مجهري.

بشكل روتيني، يتم وضع الأنسجة المأخوذة من الأعضاء بالفورمالين ذو تركيز 10٪. توضع الأنسجة في شمع البارافين للحصول على مقطع بارافين والعينة (القوالب)، ثم تجزئتها يدوياً بواسطة مشراح للحصول على قطع البارافين ذات سماكة 4-5 ميكرون. ثم يتم صبغ القطع بصبغ الهيماتوكسيلين (haematoxylin) والأيوسين (eosin)، وتكون جاهزة للفحص المجهري.

المواد والأجهزة المستخدمة لعملية التقطيع

• حمام الماء.
• حاوية مع الثلج.
• شرائح زجاج المجهر (microscope slides).
• جهاز المشراح أو الميكروتوم (Microtome) والشفرة.
• فرن.

عملية التقطيع

• وضع قطع البارافين التي تحتوي على العينات النسيجية بالثلج قبل التقسيم. يسمح الشمع البارد بالحصول على الأجزاء الرقيقة من خلال توفير الدعم لعينة الأنسجة.
• ملء الحمام المائي بالماء عالى النقاوة وتسخينه إلى درجة حرارة 40-45 درجة مئوية.
• وضع الشفرة في المكان المخصص داخل جهاز المشراح، والتأكد من أنها آمنة ويجب ضبط زاوية الخلوص. تمنع زاوية الخلوص التلامس بين وجه السكين ووجه قطع البارافين التي تحتوي على العينات النسيجية، يجب اتباع تعليمات الشركة المصنعة لجهاز المشراح للحصول على الإرشادات حول تحديد زاوية الخلوص.
• إدخال قطع البارافين التي تحتوي على العينات النسيجية وتوجيهها بحيث تكون شفرة القطع مباشرة عبر قطع البارافين.
• بعناية يتم ضبط قطع البارافين التي تحتوي على العينات النسيجية مع شفرة قطع بعض المقاطع الرقيقة لضمان تحديد المواقع الصحيحة للعينة.
• يتم تقليم قطع البارافين حتى وصولهم إلى سطح النسيج. يتم التشذيب للتخلص من شمع البارافين الزائد.
• قطع المقاطع بسمك حوالي 5 ميكرومتر (قد تحتاج إلى تجاهل الأجزاء القليلة الأولى لأنها من المحتمل أن تحتوي على ثقوب ناتجة عن التشذيب).
• باستخدام الملقط يتم التقاط شرائط المقاطع ووضعها على سطح الماء في حمام الماء حتى تتسطح. استخدم الملقط لفصل المقاطع.
• استخدام شرائح المجهر لالتقاط المقاطع من حمام الماء وتخزينها في وضع مستقيم في رف الشريحة (slide rack).
• وضع حامل الشريحة في الفرن والسماح للمقاطع بأن تجف طوال الليل عند 37 درجة مئوية.

الأخطاء أو العيوب (artifact) أثناء تحضير العينات النسيجة لفحص المجهري

الفحص المجهري للنسيج يرتبط ببعض الأخطاء (بنية أو ميزة في عينة النسيج، وهي ليست موجودة عادة في الأنسجة الطبيعية، وقد تأتي من مصادر خارجية. يتم تمييز بعض الأخطاء بسهولة وبعضها لا يميز, عندما تكون هذه العيوب موجودة قد تتداخل مع الأنسجة الطبيعية أو أي تغييرات مرضية، وبالتالي يؤدي إلى تشخيص غير دقيق). يعد إجراء اختبار عينة الأنسجة إجراء مطول. العيوب الشائعة في هذا الإجراء كثيرة ويشار إليها باسم Artifact. تعتمد دقة التشخيص المرضي على القضاء أو تقليل العيوب أثناء تحضير العينة للفحص. قد تحدث هذه الأخطاء الفنية أثناء:

• عمليات الاستئصال الجراحي للعينة.
• تثبيت العينة.
• تحضير ووضع العينة في البارافين.
• عملية التقطيع.
• صبغ العينة.

أخطاء أثناء عملية التقطيع

• المقطع سميك أو رفيع جداً بسبب شفرة المشراح غير الثابتة بشكل جيد.
• مقطع النسيج فيه انقسام بسبب الشفرة غير الحادة (يمكن تجنب هذا التمزيق باستخدام شفرة نظيفة واستبدالها بين فترة وأخرى).
• طيات مقطع الأنسجة عندما تلتصق الأنسجة إلى السطح السفلي للشفرة.